| 叶绿素测定结果经SPSS13.0软件(P分析表明：4级——极度缺铁的杂种苗与对照枳的叶绿素（cha、chb或者cha+b）质量分数均无差异，所有杂种苗叶绿素总量（cha+b）和叶绿素b（chb）质量分数显著低于资阳香橙。而0级——完全不表现缺铁症状的杂种苗叶绿素a的质量分数都显著高于1级——缺铁症状极轻的杂种苗，两者又都高于抗碱亲本资阳香橙，其他材料与父本枳的叶绿素cha质量分数都显著低于母本。因此，初步筛选到2株耐碱能力较强的株系。在后续培养中，将已表现缺铁症状的株系淘汰。
2.3.2叶片活性铁质量分数测定
继续在田间露地栽培管理一年后，父母本、耐碱株系、叶片继续黄化株系的活性铁质量分数见表2。
表2耐碱杂种苗、黄化杂种苗与父母本的新鲜叶片活性铁质量分数（增加总铁含量数据要好些）
Fig2Contentsofactiveironinfreshleavesofthetestedseedlingsofthezygoticoffspringandtheirparents.
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材料material
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叶片活性铁质量分数
Contents of active iron
in fresh leaves /mg/kg
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资阳香橙Ziyang Xiancheng(Citrus junos Sieb. ex Tanaka♀)
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24.07±2.25a
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耐碱杂种苗tolerance seedlings of zygotic offspring
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19.19±0.26b
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黄化杂种苗yellowing seedlings of zygotic offspring
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12.85±0.94c
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枳Trifoliate orange(Poncirus trifoliata (L.) Raf. ♂）
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13.60±0.94c
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经SPSS13.0软件分析，耐碱性较强的株系的叶片活性铁质量分数显著低于母本资阳香橙，但显著高于枳和黄化的杂种苗。
3讨论
三叶遗传，学术上有两种理论结论，。Wabber的研究结果表明：“枳可能具有同质结合的2个显性基因（dominantgene），当杂种一代中只要具备一个显性基因便出现三叶。但Toxopeus(1962)研究柚×马蜂柑的F1群体中，约1/3的杂种是三叶，据此他认为三叶可能由两个互补的显性基因所决定。本试验形态学结合SSR鉴定的真实杂种苗都有三叶，没有出现三叶与单身复叶的性状分离，说明本试验的4个单系枳都是由2个显性基因同质结合的，而非由两个互补的显性基因所决定。因此今后形态学就可判别：没有三出复叶的F1实生苗都不是枳的真实杂种苗。
自然授粉的飞龙枳实生苗对照树，枝与枝刺的弯曲性状出现了性状分离，有的实生苗完全不发生枝或枝刺的弯曲。本试验中飞龙枳为父本的杂种F1没有出现弯曲的枝或枝刺，说明飞龙枳的弯曲枝或枝刺可能为同质结合的隐性基因决定的，这一性状无助于以其为父本的杂种真实性鉴定，但如果以其为母本，或将有益于鉴定珠心苗。
枳是落叶果树，在重庆北碚生态条件下，1年生露地实生苗冬季都要完全落叶，但是枳与柑橘类的杂种如卡里佐枳橙或斯文格枳柚1年生实生苗在冬季常绿，这一特征能在田间将这两个枳的杂种与枳区分开来。本试验以枳为父本的杂种苗冬季都常绿，没有落叶。
SSR技术正广泛应用于指纹图谱构建和对柑橘种质遗传多样性及亲缘关系的研究，本试验利用SSR引物可以将所有真实杂种苗鉴定出来。与形态学鉴定相比较，在杂种F1群体较小时，SSR有利于提早鉴定。但在群体数以千计时，对父母本形态学差异特别明显的杂交组合，形态学鉴定有时可能更直观，更简单高效。二种方法相结合，就可事半功倍，。这对于加速砧木育种的抗性评价进程将非常有益。
本试验尝试用碱性石灰质土壤直接栽植杂种苗来鉴定杂种的耐碱性。在石灰质碱性土壤中，铁易形成不溶性的化合物而使植株缺铁，铁是合成叶绿素必需的元素，缺铁最明显的症状就是新梢叶片失绿黄化。有学者研究认为，：缺铁失绿树地上部的铁质量分数降低，但也有研究表明：黄化叶片中铁元素质量分数不变或反而升高。本试验的预试验曾用缺铁黄化的枳与正常的枳为试材，以原子吸收法测定了叶片中铁元素的质量分数，试验结果：叶片中总铁质量分数123-135mg/k二者总铁质量分数g，没有显著性差异，。预试验中，还用6%的EDDHA-Fe兑水灌根，黄化的枳叶片完全复绿。这说明：在碱性土立地条件下，树体因为缺铁而叶片黄化，生长不良，但叶片营养诊断不一定能能真实反映叶片缺铁与否却不一定有差异。因此，在本试验中，未作叶片中总铁质量分数的测定，而只作叶绿素质量分数的测定和鲜叶中活性铁质量分数的测定更能说明问题。试验结果表明：按叶片黄化程度不同，用目测分级的杂种苗，在相同的碱性土条件下，不同株系叶片出现了程度不同的黄化症状，其叶绿素质量分数呈现出显著性差异。由于cha与叶片的光合效能有关，这可能解释了耐碱的杂种株系生长量显著大于父母本的现象。耐碱的株系的cha+b和活性铁质量分数均低于耐碱亲本资阳香橙，但显著高于不耐碱的亲本枳。（这一段的讨论偏了题，不是你研究的内容）
由于枳和枳杂种的“童期”通常要数年之久，初步筛选到的耐碱株系继续鉴定一年后，仍未出现叶片黄化症状，但仍有必要等到这些株系开花结实后取种子繁殖F2实生苗进一步鉴定筛选，以进一步了解不同株系耐碱的PH极限范围。
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