论文摘要:试验不同剂量的柑橘和瓯柑橘皮的水和醇提取液对邻苯三酚自氧化的抑制作用,比较它们体外清除img2的效果,并和Vc进行比较。结果:0.1、0.2和0.3(mL)的Vc对邻苯三酚自氧化的抑制率达到47.67±2.18(%)、78.61±1.45(%)和95.69±0.36(%);呈明显的量效关系(均P<0.01)。柑橘皮水提取液的抑制率仅6.81±2.97(%),无明显的量效关系。柑橘皮的醇提取液剂量由0.1mL增加到0.2mL时,抑制率由41.79%增加至47.98%(均P<0.01),剂量增至0.3mL时,抑制率不再增加。瓯柑橘皮的水提取液由0.1mL增加到0.2、0.3(mL)时,抑制率由11.67%增加到24.88%和72.26%(均P<0.01);醇提取液由0.1mL增加到0.2mL时,抑制率由56.19%增加到95.60%(均P<0.01),剂量增加到0.3mL时,抑制率不再增加。柑橘皮水、醇提取液的抑制作用均小于同剂量的Vc。瓯柑橘皮水提取液的抑制作用小于同剂量的Vc,但醇提取液的抑制作用显著大于(P<0.01)或等于同剂量的Vc的作用。
论文关键词:邻苯三酚自氧化法,柑橘皮,瓯柑橘皮,水提取液,醇提取液
柑橘皮加工后为陈皮,是传统理气、健脾、燥湿、化痰的中药,具有抗氧化、抗炎症、增强毛细血管韧性,维持血管正常渗透压,降血脂,保护心血管,抗肿瘤等多种功效。瓯柑为柑桔属的栽培变种,原产浙南,果实清甜略带苦味,营养价值较高,具有祛热生津、化痰、止咳、清凉解毒等功效,民间有“端午瓯柑似羚羊”之说,历史上为皇家贡品。《本草纲目》等描述其为“利肠胃清热毒、解丹古毒、止暴渴”;临床研究证明瓯柑对高血压等症状有一定食疗作用。对陈皮和瓯柑果实多糖体外清除超氧阴离子自由基( )已有一些报导,但对瓯柑皮的此作用尚缺乏试验材料,本文通过不同剂量的陈皮和瓯柑橘皮的水和醇提取液对邻苯三酚自氧化的抑制作用,试验对 的清除效果,并和Vc进行比较,结果如下。
1材料与方法
1.1仪器、试剂:722分光光度计等
1.1.10.1mol/L和0.01mol/LHCl
1.1.20.2mol/Ltris:称三羟甲基氨基甲烷(tris)2.423g,以重蒸水溶解定容至100mL。
收稿日期:
电话:
1.1.3pH8.2Tris-HCl-EDTA缓冲液:50mL0.2mol/Ltris与46mL左右0.1mol/LHCl混合,内含1mmol/L的EDTA,调pH至8.2。
1.1.445mmol/L邻苯三酚:567.5mg邻苯三酚以0.01mol/LHCl溶解定容至100mL。
1.1.51mg/mLVc:50mgVc以重蒸水溶解定容至50mL。
1.2材料:柑橘市购,瓯柑橘由福建南平坎下果场种植。柑橘和瓯柑橘皮的10%水和醇浸提液:新鲜橘皮用蒸馏水洗净、烘干、粉碎;水浸提液制备方法:称取样品10g,加重蒸水100mL匀浆、过滤,过滤液以盐酸调pH至3~4沉淀蛋白,离心取上清液备用。醇浸提液制备方法:称取样品10g,加95%乙醇100mL匀浆,匀浆液过滤备用。
1.3试验设计和方法:
1.3.1邻苯三酚自氧化速率测定:参照李永利、许申鸿等报道的方法,稍加改进。在2支试管中各加9mLTris-HCl-EDTA缓冲液,对照管加40μL重蒸水,混匀,以1cm比色杯、420nm调吸光度为零,测定管加40μL邻苯三酚,混匀后立即加入1cm比色杯,准确在1、2、4、…10min时读取吸光度A,重复3次计算平均值,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标,计算回归方程和相关系数。
1.3.2不同剂量Vc、柑橘和瓯柑橘皮的水、醇浸提液抑制邻苯三酚自氧化实验:在2支试管中各加9mLTris-HCl-EDTA缓冲液、0.1(0.2、0.3)mL的Vc(或柑橘和瓯柑橘皮的水、醇浸提液),对照管加40μL重蒸水,混匀,以420nm调吸光度为零,测定管加40μL邻苯三酚,混匀后立即加入1cm比色杯,准确在1、2、4、…10min时读取吸光度A,各处理组重复测定3次。
1.4数据统计处理:试验结果列出各组吸光度的 ±S,计算10min时对邻苯三酚自氧化的抑制率的 ±S,抑制率(%)=(A-A)÷A×100。组间差异以方差分析,SSR法多重比较。
2结果:邻苯三酚自氧化速率测定结果见表1,不同剂量Vc、陈皮和瓯柑橘皮水和醇提取液抑制邻苯三酚自氧化结果见表2。
表1:邻苯三酚自氧化速率测定结果(吸光度: ±S)
Table1:determinedresultofspeedofpyrogallolautoxidation(abs: ±S)
时间1min2min4min6min8min10min
abs(n=3)0.061±0.0020.092±0.0060.162±0.0080.201±0.0060.248±0.0090.279±0.006
表2:不同剂量Vc、陈皮和瓯柑橘皮水和醇提取液抑制邻苯三酚自氧化结果(吸光度: 0±S;抑制率:%)
Table2:determinedresultsofdifferentdosesofVc,extractiveliquitbywaterandethanolofpeeloforangeandcitrussuavissimaonpyrogallolautoxidation(abs: ±S;suppressionrate:%)
分组剂量n1min2min4min6min8min10min10min抑制率
Vc0.1mL30.010±0.0010.020±0.0020.052±0.0050.085±0.0060.118±0.0070.146±0.00647.67±2.18
0.2mL30.007±0.0010.009±0.0010.014±0.0020.022±0.0030.038±0.0040.060±0.00478.61±1.45
0.3mL30.003±0.0020.005±0.0020.005±0.0020.007±0.0020.009±0.0010.012±0.00195.69±0.36
陈皮0.1mL30.042±0.0090.077±0.0060.134±0.0070.183±0.0080.224±0.0090.263±0.0106.07±3.41
水提0.3mL30.034±0.0100.070±0.0100.130±0.0080.182±0.0110.224±0.0120.260±0.0127.26±4.19
取液0.3mL30.047±0.0100.080±0.0030.124±0.0070.173±0.0020.220±0.0030.257±0.0058.10±1.69
陈皮0.1mL30.020±0.0020.038±0.0020.071±0.0030.102±0.0040.134±0.0050.163±0.00641.79±2.18
醇提0.2mL30.004±0.0010.020±0.0020.052±0.0020.085±0.0040.118±0.0050.146±0.00447.98±1.48
取液0.3mL30.004±0.0010.020±0.0020.051±0.0030.081±0.0020.112±0.0150.140±0.00150.12±0.21
瓯柑0.1mL30.038±0.0020.070±0.0040.125±0.0070.172±0.0070.211±0.0080.247±0.00611.67±2.30
水提0.2mL30.024±0.0050.053±0.0050.103±0.0040.145±0.0050.180±0.0060.210±0.00824.88±2.77
取液0.3mL30.011±0.0020.024±0.0030.045±0.0030.060±0.0040.070±0.0040.078±0.00472.26±1.35
瓯柑0.1mL30.006±0.0010.021±0.0020.047±0.0020.073±0.0020.099±0.0030.123±0.00356.19±0.90
醇提0.2mL30.005±0.0010.007±0.0010.010±0.0020.011±0.0010.012±0.0010.012±0.00195.60±0.41
取液0.3mL30.005±0.0010.006±0.0010.008±0.0030.009±0.0030.009±0.0030.009±0.00396.43±1.29
3分析与讨论
3.1邻苯三酚在碱性条件下能迅速自氧化,并同时释放出 , 又加速邻苯三酚自氧化速率,同时产生有色中间产物,中间产物在321nm和420nm左右有强烈的吸收,通过测定吸光度可以测定邻苯三酚的自氧化速率。 1/2 1 2 下一页 尾页 |