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资阳香橙×枳杂种苗鉴定及耐碱株系初步筛选_砧木-论文网

时间:2013-12-18  作者:彭良志,曹立,彭爱红,凌丽俐,江东
箭头表示父本特征带。

M:50bpDNAMarker;01:ZiyangXiangcheng♀;02:normaltrifoliateoranges♂;03-20:zygoticoffspring

图5CSSR038号引物对形态学杂种F1代群体的扩增图谱

Fig.5ElectrophoreticpatternofthecoupleofparentsandtheirzygoticoffspringforprimerCSSR038

 
 

M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

150bp

200bp

M:50bpDNAMarker;01:资阳香橙♀;02:普通枳♂,3-20:对应代表F1代群体中的1-18号。箭头表示父本特征带。

M:50bpDNAMarker;01:ZiyangXiangcheng♀;02:normaltrifoliateoranges♂;03-20:zygoticoffspring

图6SS17号引物对对形态学杂种F1代群体的扩增图谱

Fig.6ElectrophoreticpatternofthecoupleofparentsandtheirzygoticoffspringforprimerSS017

用CSSR038与SS17号引物进行鉴定时,两对引物的鉴定结果是一致的,杂种苗均含有资阳香橙和枳的特征带。其中CSSR038的特征带在F1出现性状分离。

两对引物都没有父本特征带的实生苗与形态学对比后,都无三叶,均淘汰不进行评价。

2.2.2旺苍大叶枳♀×资阳香橙♂的F1代群体的分子生物学鉴定

由于枳的三叶为显性性状,因而,旺苍大叶枳♀×资阳香橙♂的F1代群体的叶片都具有三叶的特性,在冬季落叶以前不易从形态学上有效的区分杂种苗和珠心苗。利用SS17号引物,对旺苍大叶枳×资阳香橙杂交所获得的所有F1代群体进行了SSR鉴定,从F1代群体中获得了13株杂种苗。

 
 

M 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

200bp

150bp

M:50bpDNAMarker;01:旺苍大叶枳♀;02:资阳香橙♂,3-15:F1代群体中的杂种苗。16-20:F1代群体中的珠心苗。箭头表示父本特征带。

M:50bpDNAMarker;01:Wangchangtrifoliateoranges♀;02:ZiyangXiangcheng♂;03-15:zygoticoffspring;15-20nucellarseedlings.

图7SS17号引物对旺苍大叶枳×资阳香橙的F1代群体的扩增图谱

Fig.7Electrophoreticpatternofthecoupleofparents,zygoticoffspringandnucellarseedlingsforprimerSS017

SSR鉴定表明:4个以资阳香橙为母本的杂交组合,所有的杂种苗都有枳的三叶特征。而没有三叶的实生苗,尽管出现过完全不同于母本的叶形变异特征(见图3),但都不是真实杂种苗。因此F1代叶形与母本叶形没有差异的实生苗都是资阳香橙的珠心苗,可以提前淘汰。

形态学上难以区分的2株资阳香橙♀×普通枳♂F1实生苗:第518号株系在第22片叶片才表现出二出复叶特征,但其后,该实生苗和该株系的高接树一年后,都无二出或三出复叶;第51号株系,除二出复叶与三叶外,在第6、第8叶还表现出五出羽状复叶特征,这种羽状复叶与卡里佐枳橙的个别株系相同。经这两对SSR引物鉴定结果:518号株系的谱带与母本资阳香橙完全相同,是珠心苗;51号株系为真实杂种苗。反交也有2个株系出现5出复叶,经SSR鉴定同样是真实杂种苗。

2.3耐碱杂种苗初步筛选

2.3.1叶绿素质量分数测定

在pPH8.1的碱性土条件下,移栽8个月后,枳已表现出严重的缺铁黄化症状,而资阳香橙嫩梢叶片略有黄化,香橙与枳的杂种F1表现出程度不同的耐碱性,按叶片黄化程度,可以分成5个级别。筛选到2株真实杂种苗缺铁黄化程度为0级,即完全不表现缺铁黄化症状,。其他杂种苗叶片黄化级别为:1级14株,2级23株,3级23株,4级55株。

杂交亲本及各级别杂种苗叶片叶绿素质量分数见图8。

图8香橙与枳杂种苗缺铁程度与叶绿素质量分数的关系。IV:4级黄化叶片;III:3级黄化叶片;II:2级黄化叶片;I:1级黄化叶片;0:0级无症状叶片;香橙(female);枳(male)

Fig9Contentsofchlorophyllinleavesofthetestedseedlingsatdifferentyellowinglevelsofzygoticoffspringandtheirparent.IV:Thefourthgradeyellowingleaves;III:Thethirdgradeyellowingleaves;II:Thesecondgradeyellowingleaves;I:Thefirstgradeyellowingleaves;0:Zerogradeyellowingleaves;female:ZiyangXiancheng(CitrusjunosSieb.exTanaka♀);male:Trifoliateorange(Poncirustrifoliata(L.)Raf.♂)

4级——极度缺铁的杂种苗与对照枳黄化程度无差异,而0级——不表现缺铁症状的杂种苗叶片颜色青绿色,与资阳香橙相当。

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