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图1引物2123
Fig.1primer2123
 图2引物3797
Fig.2primer3797
注：1-52分别代表9311，日本晴，KentaNangKa，嘉南9号，明恢72，2428，92gk729，97gk419，97gk1019，97gk1037，97gk2046，20gk719，47粳，华明921，WJ413，多系1号，亚恢420，明恢86，R527，MHR18，超引一号，9308，明恢398，明恢413，明恢416，明恢417，明恢419，明恢436，明恢3009，明恢502，明恢503，明恢504，明恢506，明恢507，明恢508，明恢509，明恢510，明恢511，明恢512，明恢513，明恢514，明恢515，明恢516，明恢517，明恢519，明恢523，明恢524，明恢527，明恢530，明恢532，明恢533，明恢534。
作进一步检测时，用筛选的58对ILP引物对52份试验材料进行扩增，其中引物2123和引物3797扩增结果见上图1、图2。
2.2系统聚类分析
由图3可知，从相似系数0.74处分开，供试的52个亲本和品系经58对水稻特异ILP引物的PCR扩增检测，可以明显地分为两大类；若从相似系数0.45处分开，供试的52个亲本和品系可分为7类。但为了更清晰的界定本材料的亲缘关系，本试验选定了从相似系数0.67处分开，可分为籼稻，中间型和粳稻三大类，这3种类中第三类最多，其中差异最大的品种间相似系数为0.51，籼型包含在该类型中，其相似系数较相近，它们之间差异不大；中间型包括4个品种；粳型虽包含较少品种(7个)，但它们之间的差异较大，差异最大的品种间相似系数也有0.67。
3讨论
由于环境因素的影响，传统的形态特征很难鉴定出种质资源的亲缘关系。本研究采用ILP分子标记对供试材料进行亲缘关系分析，由于ILP分子标记所用的引物长度一般在15-20bp左右，退火温度在55-60℃之间，保证了引物扩增的重复性和特异性，提高了分类结果的准确性，所以此方法作为籼粳亚种种质资源的聚类分析，结果比较稳定可靠，可为亲本选配提供可靠的分子水平信息。
同时，我们也要注意到标记数目的选择对结果的可靠性有很大的影响，标记数目太少，所获得的结果具有较大的随机性，并不能反映亲本之间的真实亲缘关系。而前人的诸多研究中，使用的标记数量都较少，段世华等选用分布于水稻12条染色体上的25对SSR标记，分析了生产中广泛应用的35个杂交水稻恢复系。朱作峰等用30对SSR标记比较了52份不同生态型的栽培稻和34份不同省(区)的普通野生稻的遗传多样性。谢建坤等利用14对SSLP标记对东乡野生稻进行多样性分析。和本研究相比，其他研究者在研究对象的数量上比本实验多出很多，这也决定了他们在标记数量的选择上不可能太多，但从本研究结果来看，标记数量的选择对结果具有很大的影响，只有标记数达到一定数量，所得结果才较为可靠。
基于50个籼粳种质资源的聚类结果，我们还可以从中选择第二、第五和第六类群（以分成七个类群为例）作深入的研究，即从第二类群粳稻品系中的第1号品系，第五类群13个籼型品系中的第5、6、11、13号品系，第六类群的籼型品系第13、24号，选择按不同年代育成主要以籼稻为主的共7个品系，作为恢复系进一步研究。通过对其产量和茎杆性状的遗传效应和杂种优势测定，分析亲本遗传特点与利用潜力，以便寻找到最优配置，为今后育种方案的制订提供依据。
 图352个籼粳种质资源聚类图
Fig.352IndicaandJaponiceidioplasmresourcesclusterpicture
参考文献
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