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食物中硒的生物功能及测定分析研究-论文网

时间:2014-04-03  作者:林文业,邓卫利,黄文琦,陈桂鸾,韦小烨,罗艳,黄一帆
电感耦合等离子体质谱法测定保健食品中的硒,建立(ICP-MS)测定富硒保健食品中硒元素的方法,样品经高压微波消解处理后,应用ICP-MS测定其中硒元素含量,方法测定硒元素的标准曲线线性相关系数为0.9999,加标回收率范围在99.40%~100.15%,检出限为0.078g/L,相对标准偏差范围在0.91%~2.65%。

1.6液相色谱与原子荧光光谱联用法(HPLC-AFS):液相色谱-双道原子荧光检测联用法同时测定砷和硒的形态,建立了同时测定人体尿样及硒酵母片中7种不同形态的砷、硒化合物的HPLC-AFS联用方法,其中对硒的SeCys、SeMet和Se(Ⅳ)化合物的检出限分别为4g/L、18g/L和3g/L。

1.7液相色谱与ICP-MS联用法(HPLC-ICP-MS):高效液相色谱-等离子体质谱联用方法研究富硒大米中硒的形态,用HPLC-ICP-MS法对大米蛋白提取液中含硒蛋白组分及含硒氨基酸组成进行初步分析。结果表明:大米中的硒主要与蛋白质结合,在4类蛋白提取液中硒含量由高到低的分布顺序为:谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白。清蛋白提取液中,分子量为12.6kDa蛋白是主要的含硒蛋白组分,大米中约30%的硒以硒代半胱氨酸形式存在。高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术用于元素形态分析的研究进展,介绍了(HPLC-ICP-MS)联用技术在环境、材料和生命科学样品的元素形态分析中的研究进展,着重介绍该联用方法的接口技术及几种与ICP-MS联用的主要色谱类型,阐述了几种样品预处理方法,并对样品引入系统、复杂基体分离和元素形态定量和结构分析等联用技术在元素形态分析中所面临的问题进行讨论。高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法分析生物样品中硒的化学形态,建立了用于生物样品中含硒化合物在线分离分析的联用方法。用反相离子对高效液相色谱(RP-IPHPLC)分离含硒化合物,用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)在线分析硒含量。与标准化合物的色谱图和工作曲线对照进行定性和定量分析,实现了对硒酸钠、亚硒酸钠、硒代胱氨酸、硒代胱胺、硒代蛋氨酸、硒代尿素和三甲基硒离子等7种生物体常见的含硒小分子的分析,检出限为0.1~1.5g/L,线性范围为1~100g/L,应用于人血清、尿、肝组织细胞质溶胶等样品中含硒小分子的形态分析,所需进样量仅50L,各含硒化合物加标回收率在93%~117%。蒲云霞等主要综述高效液相色谱-电感耦合等离子质谱联用在线技术(HPLC-ICP-MS)在硒化学形态研究中的进展,应用HPLC在分离硒化物时具有很好的重现性,HPLC用ICP-MS作为检测技术采用碰撞池技术对硒元素具有很好的检出限。Encinar等采用碰撞池技术对人的血清中硒元素进行检测,检出限低于0.5g/kg。

1.8气相色谱-石墨炉原子吸收光谱联用法(GC-GAAS):气相色谱-石墨炉原子吸收光谱联机研究及有机硒的形态分析,测定二甲基硒和二乙基硒的检出限分别为0.14ng和0.28ng,线性范围为0~20ng。

2硒的生理生化功能和作用

2.1硒参与酶的催化反应:硒是动物生命中必需的微量元素,是谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性中心元素。它能催化有毒的过氧化物还原为无害的羟基化合物,从而保护所有的生物膜不被氧化所降解。硒在机体中多以硒蛋白形式存在。硒蛋白是某些细菌、鸟类、哺乳动物(可能也包含植物)的酶系统的基本成分。其功能促使正常代谢过程中产生的有毒过氧化物的分解,防止其堆积,进而保护细胞中重要的膜结构不受损害;直接参与膜磷脂过氧化氫的还原,从而保护生物膜等。硒对人体来说,最关键的是能抗氧化,能把人体内产生的过氧化物还原、分解掉,降解和消除自由基,保护细胞膜不受自由基的破坏。

蛋白硒属有机硒中的上品,不仅含有人体不能合成的八种必需氨基酸,而且,其中有三种氨基酸中硫键上的硫被硒所代替,合成为含硒氨基酸。其中硒半光氨酸是谷胱甘肽过氧化物酶的活性中心,谷胱甘肽过氧化物酶是消除自由基的多面手,它的抗氧化活性非常大,是人体中80%以上的硒是半胱胺酸的形式在体内代谢的。

2.2硒与机体免疫:硒对体液免疫功能、细胞免疫功能及吞噬细胞功能均有一定影晌。硒能促进淋巴细胞产生抗体,使血液免疫球蛋白水平增高而维持正常,增强机体对疫苗或其他抗原产生抗体能力。硒缺乏会降低多种动物的免疫功能,适当补硒可使非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫功能得到改善。在非特异性免疫方面,亚硒酸钠协同激活因子激活巨噬细胞,增强其杀菌活性,提高其吞噬率。在细胞免疫方面,硒和维生素E协同作用可明显提高自然杀伤细胞(NK)活性和T淋巴细胞转化率,硒能增强淋巴细胞产生白介素-2(IL-2)的能力,而IL-2可明显增加NK对肿瘤细胞的杀伤作用。

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