论文导读::以皇帝蕉、巴西蕉和粉蕉3个品种成熟果实为试材,利用HPLC技术进行果实品质中糖酸组分分析。结果表明,成熟果实中均含有3种糖份,分别是蔗糖、葡萄糖和果糖,果实中以积累蔗糖为主;皇帝蕉果实中蔗糖、葡萄糖、果糖和总糖含量最高,分别是:83.66 mg/gFW、32.72 mg/gFW、23.62 mg/gFW和140.00 mg/gFW,品种间糖组分及总糖含量变化趋势表现为:皇帝蕉>巴西蕉>粉蕉;果实中均含有11种有机酸,分别是苹果酸、柠檬酸、酒石酸、奎尼酸、草酸、α-酮戊二酸、乳酸、抗坏血酸、富马酸、琥珀酸和没食子酸;其中以积累苹果酸为主,占有机酸总量的48.11%,其次是柠檬酸占有机酸总量的19.41%;品种间主要有机酸及有机酸总量变化趋势为粉蕉>巴西蕉>皇帝蕉。
论文关键词:高效液相色谱仪,香蕉,果实糖酸组分
香蕉(Musa spp)是高效益热带作物,是华南四大名果之一,也是一些发展中国家和地区重要的粮食作物。皇帝蕉(Musa paradisiaca AA)原产印度尼西亚,印尼称其为Pisanmas,是独特的食用二倍体(AA型)蕉,因古时为泰国、越南进贡皇帝佳果而又被称为贡蕉,在缅甸因其甜度高又称其为甜蕉 [1];巴西蕉(Musa AAA Giant Cavendish cvBrazil)于1990年前后由外资企业从巴西引入,目前为我国香蕉主栽品种之一;粉蕉(MusaAAB group Fenjia),广西和海南又称蛋蕉或糯米蕉,云南河口称西贡蕉[2]。随着国民生活水平的不断提高而对香蕉果实品质也越来越高期刊网,尤其是香蕉出口创汇方面对果实品质要求更高。香蕉果实品质包括外观和内在品质两个方面,外观品质是指果面色泽、果实大小、形状、果皮厚度、果肉质地等;内在品质主要是糖、酸含量以及糖酸比、香气、果肉纤维素含量、矿质成分、类胡萝卜素和维生素含量等。香蕉种质资源丰富,种植品种繁多,在众多的香蕉品种中,大多数从优化栽培技术、抗性生理、采后生理等研究,但利用高效液相色谱对众多品种的品质研究较少,本研究是采用高效液相色谱对3个不同基因型香蕉成熟果实的糖和有机酸进行测定分析比较,以期为香蕉育种及果实品质调控提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
巴西蕉(Musa AAA Giant Cavendish cvBrazil)、粉蕉(MusaAAB group Fenjia)和皇帝蕉(Musa paradisiaca AA)3个品种果实为试材;DIONEX 3000型高效液相色谱仪;草酸、酒石酸、奎尼酸、苹果酸、抗坏血酸、乳酸、α-酮戊二酸、柠檬酸、富马酸、琥珀酸、没食子酸、果糖、葡萄糖、蔗糖等标准品均购自sigma公司,均为色谱纯。
1.2 实验方法
果实于2010年2月采自海南福山香蕉基地,立地条件及管理水平一致,八成熟的香蕉果实采后24h内运回实验室(海南儋州),果形均匀,健康饱满,无伤、无病虫害,把采下的果实分梳取下,清水洗净后经0.213g/L的异菌脲表面消毒后贮于相对湿度81%-95%、温度25℃的条件下任其自然成熟再取样,把不同部位的果混合取样[3],[1]样品用液N2研磨成粉,贮于-76℃备用,每项指标重复3次。
用DIONEX 3000型高效液相色谱仪测定香蕉果实中的糖和有机酸组分及其含量。其中期刊网,糖的提取参考[4]的方法,糖的测定用Ultimate-3000-RI101示差折光检测器,色谱条件为: HYDERSIR-NH2 柱(大连依利特,250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈:水=8:2(V/V),流速1 mL/min,柱温35℃,进样量20μL。有机酸提取参考牛景等[5]的方法,用DIONEX PDA-100二极管阵列检测器测定,色谱条件为:0.01mol/L KH2PO4-H3PO4缓冲溶液(pH2.6)用0.45μm孔径的水相滤膜过滤,再经超声波脱气后用作流动相。色谱柱为Venusil XBP-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流速1 mL/min,柱温27℃,进样量10μL,检测波长210 nm。用标准品制作标准曲线,根据标准曲线计算香蕉果实中糖和酸各组分的含量,以三次重复平均值表示各组分含量,实验数据采用SAS9.0统计软件对数据进行方差分析。
表1 回归方程、相关系数、线性范围和检出限
Table 1 Regression equation、Correlationcoefficient、Linear range and detection limit
标样
|
回归方程
|
相关系数
|
线性范围(mg/ml)
|
检出限(mg/ml)
|
草酸
|
y=0.1108x+0.119
|
0.9998
|
0.01-0.5
|
0.4
|
酒石酸
|
y=0.1551x+0.1629
|
0.9995
|
0.01-0.5
|
2.0
|
奎尼酸
|
y=0.0063x+0.0592
|
0.9998
|
0.01-0.5
|
0.6
|
苹果酸
|
y=0.0194x+0.0199
|
0.9996
|
0.01-0.5
|
0.2
|
抗坏血酸
|
y=1.1135x-0.47
|
0.9997
|
0.01-0.5
|
0.5
|
乳酸
|
y=0.2681-0.7781
|
0.9998
|
0.01-0.5
|
1.0
|
α-酮戊二酸
|
y=0.0738x+0.2108
|
0.9999
|
0.01-0.1
|
0.3
|
柠檬酸
|
y=0.013x-0.0087
|
0.9993
|
0.01-0.5
|
1.0
|
富马酸
|
y=1.1895x+0.1921
|
0.9999
|
0.01-0.5
|
0.74
|
琥珀酸
|
y=0.0594x-0.0425
|
0.9997
|
0.01-0.1
|
0.05
|
没食子酸
|
y=0.0322x+0.3017
|
0.9996
|
0.01-0.5
|
0.1
|
果糖
|
y=3.2244x+0.0798
|
0.9999
|
0.625-20
|
2.74
|
葡萄糖
|
y=3.1507x+0.2928
|
0.9998
|
0.625-20
|
3.28
|
蔗糖
|
y=3.1899x+0.3665
|
0.9999
|
0.625-20
|
4.13
|
2 结果与分析
2.1 HPLC对3个不同基因型香蕉成熟果实中糖组分分析
通过用HPLC对3个不同基因型香蕉成熟果实糖分的测定期刊网,表2表明,成熟香蕉果实中含有3种糖分,分别是蔗糖、葡萄糖和果糖,但以积累蔗糖为主。
2.2 3个不同基因型香蕉成熟果实中糖分含量显著性分析
不同基因型香蕉果实中各糖分含量存在着显著性差异,这些糖分含量的不同,从而影响着不同香蕉品种果实间风味各异。表2可知,香蕉成熟果实中的可溶性糖主要以蔗糖、葡萄糖和果糖的形式存在,品种间糖分及总糖含量均存在极显著的差异,巴西蕉果实中蔗糖含量高达89.12 mg/gFW,极显著高于皇帝蕉和粉蕉,粉蕉蔗糖含量最低仅为64.23 mg/gFW,皇帝蕉果实中蔗糖含量居于两者之间;皇帝蕉果实中葡萄糖和果糖含量分别是32.72和23.62 mg/gFW,均极显著高于巴西蕉和粉蕉,粉蕉葡萄糖和果糖含量最低仅为13.33 和15.95 mg/gFW;同样,糖分总含量中,皇帝蕉含量最高,高达140 mg/gFW,极显著高于巴西蕉和粉蕉,品种间糖分总含量变化趋势是皇帝蕉>巴西蕉>粉蕉。
表2 3个不同基因型香蕉果实中糖组分及含量(mg/gFW)
Table 2 Three differentgenotypes of banana fruit sugar composition and content(mg/gFW)
品种
Cultivars
|
蔗糖
Sucrose
|
葡萄糖
Glucose
|
果糖
Frutose
|
总糖
∑Sugurs
|
皇帝蕉Huangdi banana
|
83.66±0.34Bb
|
32.72±0.19Aa
|
23.62±0.22Aa
|
140.00±1.25Aa
|
巴西蕉
Baxi banana
|
89.12±0.96Aa
|
26.31±0.24Bb
|
19.24±0.26Bb
|
134.67±0.89Bb
|
粉蕉
Fen banana
|
64.23±0.26Cc
|
13.33±0.20Cc
|
15.95±0.10Cc
|
93.51±0.58Cc
|
*注:不同小写字母表示(α<0.05)差异显著,大写字母不同表示(α<0.01)差异显著。*Note: Different lowercase letters (α <0.05)significant difference, Differentcapital letters that (α <0.01) significant difference.
2.3 HPLC对3个不同基因型香蕉成熟果实中有机酸组分的分析
表3可知期刊网,通过HPLC对3个不同基因型香蕉成熟果实中有机酸的检测,3个香蕉品种成熟果实中均含有11种有机酸,苹果酸、柠檬酸、酒石酸、奎尼酸、草酸、α-酮戊二酸、乳酸、抗坏血酸、富马酸、琥珀酸和没食子酸。其中成熟香蕉果实中以积累苹果酸和柠檬酸为主,占有机酸总量的48.11%属于大量有机酸,其次是积累柠檬酸、酒石酸、草酸和α-酮戊二酸,分别占总有机酸的19.41%、10.67%、9.08%和8.41%,属于香蕉果实中的中量有机酸,其他属于微量有机酸。
2.4 3个不同基因型香蕉成熟果实中有机酸组分含量的差异性分析
表3可知,品种间各有机酸均存在不同程度的显著性差异,这也是决定不同品种果实间风味各异的重要因素。粉蕉果实中积累苹果酸含量最多,高达13.87 mg/gFW,极显著高于巴西蕉和皇帝蕉,而巴西蕉中含量为10.34 mg/gFW,皇帝蕉中含量仅有8.64 mg/gFW;粉蕉成熟果实中积累柠檬酸含量高达5.93 mg/gFW,极显著高于巴西蕉和皇帝蕉,巴西蕉含量为4.29 mg/gFW,皇帝蕉仅含3.03 mg/gFW;有机酸总含量最高的是粉蕉,含量高达29.71 mg/gFW,极显著高于巴西蕉和皇帝蕉,而巴西蕉和皇帝蕉含量分别为21.86 mg/gFW、16.71 mg/gFW期刊网,有机酸总含量变化趋势是皇粉蕉>巴西蕉>帝蕉;表3同样表明其他几种有机酸含量间的差异性。
表3 3个不同基因型香蕉果实中有机酸组分及含量(mg/gFW)
Table 3 Three different genotypes ofbanana fruit components and contents of organic acids
品种
Cultivars
|
苹果酸
Malic
|
柠檬酸
Citric
|
酒石酸
Tartaric
|
奎尼酸
Quinic
|
草酸
Oxalic
|
α-酮戊二酸
α-ketoglutaric
|
皇帝蕉
|
8.64±0.02Cc
|
3.03±0.05Cc
|
1.34±0.29c
|
0.3±0.01Bb
|
0.78±0.01Cc
|
1.54±0.03b
|
巴西蕉
|
10.34±0.07Bb
|
4.29±0.09Bb
|
2.56±0.09b
|
0.15±0.01Cc
|
1.16±0.01Bb
|
2.59±0.10a
|
粉蕉
|
13.87±0.08Aa
|
5.93±0.15Aa
|
3.38±0.29a
|
1.12±0.01Aa
|
4.26±0.04Aa
|
1.61±0.03b
|
占总酸比率(%)
|
48.11
|
19.41
|
10.67
|
2.33
|
9.08
|
8.41
|
品种
Cultivars
|
乳酸
Lactic acid
|
抗坏血酸
VC
|
富马酸
Fumarate
|
琥珀酸
Succinate
|
没食子酸
Gallic acid
|
总酸
∑acids
|
皇帝蕉
|
0.02±0.01Bb
|
0.01±0.14Bb
|
0.04±0.05Aa
|
0.02±0.001Cc
|
0.98±0.03Aa
|
16.71±0.09Cc
|
巴西蕉
|
0.02±0.01Bb
|
0.01±0.11Bb
|
0.02±0.02Bb
|
0.49±0.01Aa
|
0.22±0.01Bb
|
21.86±0.05Bb
|
粉蕉
|
0.04±0.02Aa
|
0.03±0.15Aa
|
0.01±0.04Cc
|
0.29±0.01Bb
|
0.17±0.01Bc
|
29.71±0.06Aa
|
占总酸比率(%)
|
0.12
|
0.08
|
0.1
|
1.17
|
2.01
|
|
*注:不同小写字母表示(α<0.05)差异显著,大写字母不同表示(α<0.01)差异显著 *Note: Differentlowercase letters (α <0.05) significant difference, Differentcapital letters that (α <0.01) significant difference.
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