论文导读:：但利用高效液相色谱对众多品种的品质研究较少。法测定阳春滴丸中淫羊藿苷的含量。
论文关键词：阳春滴丸，淫羊藿苷，高效液相色谱，含量测定
本品由部颁标准收载的品种阳春胶囊（WS3-B-3834-98）改变剂型而成〔1〕。由水貂鞭粉、羊鞭胶、狗肾胶、鹿茸、首乌、山药、菟丝子、枸杞子、肉苁蓉、黄芪、熟地黄、阳起石、淫羊藿十三味药材组成。其主要功能为补肾、益精补虚，用于由肾虚引起的头昏耳鸣，腰膝酸软，神疲健忘。经过方法学研究，建立淫羊藿苷HPLC含量测定方法含量测定，方法简便，可靠，准确，可以用于阳春滴丸的质量控制。
1、仪器与试药
waters515 高效液相色谱仪；waters2487 紫外检测器；HedraODS-2 (Size:250mm×4.6mm，Media:10nm 5um)色谱柱。淫羊藿苷（110737-200312中国药品生物制品检定所）（供含量测定用）；阳春滴丸（批号：20090403，徐州生物工程高等职业学校实训室生产）；淫羊藿阴性对照滴丸（批号：20090404徐州生物工程高等职业学校实训室生产）论文开题报告范例。甲醇为色谱纯，乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯，水为重蒸馏水。阳春滴丸为徐州生物工程高等职业学校实训室提供，批号为：20090601、20090602、20090603、20090604、20090605、20090606、20090607、20090608、20090609、20090610。
2 阳春滴丸中淫羊藿苷的含量测定〔2－6〕
2.1对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定含量测定，加流动相制成每毫升约含0.05mg的溶液，即得。
2.2供试品溶液的制备取本品适量，研细，取粉末约1.0g，精密称重，置具塞锥形瓶中，精密量取稀乙醇25ml加入锥形瓶中，密塞。精密称定重量。冷水超声0.5小时，放冷，精密称重，用稀乙醇补足减失的重量含量测定，滤过，取续滤液，即得。
2.3 色谱条件的选择 选择色谱柱：HedraODS-2 (Size:250mm×4.6mm，Media:10nm5um)；乙腈：水（25：75）为流动相；流速0.8ml/min。检测波长270nm。理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1500。
2.4空白试验
按本制剂处方比例及制备工艺，不加入淫羊藿药材，制得缺淫羊藿的空白样品。按样品溶液制备方法制备空白对照溶液。分别精密吸取淫羊藿苷标准对照溶液、样品溶液和空白对照溶液各10ul，分别进样测定，可见：淫羊藿苷峰位在12分钟左右，样品溶液有同样的吸收峰，而空白溶液在相应位置无吸收，不影响淫羊藿苷定量。2..5标准曲线的制备 精密称定80℃减压干燥至恒重的淫羊藿苷对照品适量含量测定，加流动相制成每1ml含0.056mg的溶液论文开题报告范例。分别精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl注入液相色谱仪，测定，测得峰面积。对峰面积与进样量进行直线回归处理。得回归方程y=3E+06x+57560；相关系数r＝0.9998。表明淫羊藿苷进样量在 0.112~0.560μg之间与峰面积分值呈线性关系。
表1:线性试验
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进样量(ug)
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0.112
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0.224
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0.336
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0.448
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0.560
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峰面积
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316987
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653763
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990349
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1308183.5
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1613538
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2.6 精密度试验
取0.056mg/ml的淫羊藿苷对照品溶液，精密吸取对照品溶液10μl注入液相色谱仪测定，连续进样6次，分别测定其峰面积。RSD%为0.66%。峰面积见下表2。结果表明精密度良好。
表2:系统精密度试验
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序号
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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峰面积
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1664798
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1677076
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1659401
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1666772
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1645027
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1670088
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RSD值（%）
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0. 6 6
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2.7重复性考察 称取阳春滴丸样品5份，每份约0.5g，均精密称定，照测定法项下供试液制备方法进行处理，测定结果如下表：
表2：重复性实验结果 批号：20090403
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序号 样品峰面积 样品含量(mg/g) 平均含量(mg/g) RSD%值
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1 689201.5 0.5774
2 686791.5 0.5731
3 693870 0.5798 0.5779 0.55
4 696838.5 0.5778
5 700600 0.5816
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结果表明重复性良好。
2.8稳定性试验
按样品溶液制备方法制得供试溶液，精密吸取供试品溶液10μl注入液相色谱仪测定。分别于0、1、3、6、12、24小时后测定一次。结果见表5：表明供试溶液至少在24小时内稳定。
表5：系统稳定性试验结果批号： 20090403
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序号
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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峰面积
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750661
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747855
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743276
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745815
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748294
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742394
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RSD值（%）
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0.42%
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2.9回收率试验 釆用加样回收试验方法含量测定，取已知淫羊藿苷含量的同批样品各5份（重复性试验项下），精密量取0.028mg/ml的对照品溶液5ml置入10ml容量瓶中，加入上述已知含量的溶液至刻度，即得论文开题报告范例。依法测定，计算回收率。结果见表3：
表3：加样回收率试验结果批号：20090403
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编号 加入量(mg) 测得值(mg) 样本含量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
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1 0.70 1.2711 0.5764 99.25
2 0.70 1.2610 0.5743 98.09
3 0.70 1.2775 0.5803 99.60 98.85 0.68
4 0.70 1.2766 0.5827 99.12
5 0.70 1.2733 0.5859 98.21
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结果表明试验方法的回收率高，符合含量测定要求。
2.10样品含量测定 依上述建立的含量测定方法，对十批中试样品定量，结果见下表：
表4：十批中试样品含量测定
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样品批号
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含量(mg/g)
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20090601
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0.5888
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20090602
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0.5924
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20090603
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0.5824
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20090604
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0.5959
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20090605
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0.5675
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20090606
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0.5688
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20090607
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0.5780
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20090608
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0.5763
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20090609
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0.6028
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20090610
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0.5893
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根据对十批中试样品的含量测定数据统计结果显示：最高含量为0.6028mg，最低含量为0.5675mg，RSD%为1.99％，结果表明本品工艺稳定含量测定，产品质量无显著性差异。
3.讨论
经参考相关文献资料和试验摸索我们对淫羊藿苷的测定方法作了改进。本标准中采用了流动相溶解淫羊藿苷采用乙腈：水（25：75）的流动相，保留时间合适，约在12分钟，分离度大于1.5，符合2005版药典要求。且理论塔板数大于2000，高于2005版药典淫羊藿苷项下HPLC检测理论塔板数1500的要求。结果表明新的流动相测定准确度高、重现性良好，满足大生产中检验控制的要求。最终我们采用了乙腈：水（25：75）的流动相。
参考文献
1.国家药品标准阳春胶囊（WS3-B-3834-98）
2.陈定一.分析化学[M].学苑出版社,19953.肖崇厚,陆蕴如等.中药化学[M].上海科学技校术出版社,1985
4.于立芬.数理统计方法[M].上海:上海科技出版社,1984,170
5HPLC法测定阳春口服液中淫羊藿苷的含量.中医药导报[J].
6.《中华人民共和国药典》2005版一部[S]北京化学工业出版社.2005
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