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“金桃”猕猴桃胚乳植株再生体系的优化_胚乳培养-论文网

时间:2014-01-22  作者:赵丹丹,龙自立,刘永立
Table2.1EffectsofPlantGrowthregulatorsoncallusinductionfromendospermof‘Jintao’

植物生长调节剂

Plant Growth regulators

外植体数量

Number of explants

愈伤组织形成率

Rate of callus induction

(%)

NAA

2,4-D

BA

mg/L

mg/L

mg/L

0

0

0

45

0.00

0

0.5

0.5

45

22.22 cde

0

0.5

1

45

24.44 bcd

0

0.5

3

45

20.00 cde

0

1

0.5

45

35.55 bcd

0

1

1

45

40.00 b

0

1

3

45

71.11 a

1

0

0.5

45

13.33 de

1

0

1

45

15.56 de

1

0

3

45

15.56 de

2

0

0.5

45

11.11 e

2

0

1

45

22.22 cde

2

0

3

45

17.78 de

注:数据为接种45d后统计;平均值;表示处理间在5%水平上显著性差异(邓肯式多重分析)。

Note:Dataweretakenafter45daftercultured;Mean;Valuesfollowedbysameletterswithinacolumnarenotsignificantlydifferentatthe5%level(Duncan’smultiplerangetest).

对比2,4-D和NAA对胚乳愈伤组织诱导作用,发现2,4-D对胚乳愈伤组织的诱导效果较显著,并且其诱导的愈伤组织增殖能力强,而不分化。在NAA高浓度组(3mg/L)处理中,胚乳愈伤组织的诱导率较高,而低NAA浓度下(0.5mg/L和1mg/L),诱导率较低。

2.2植物生长调节剂对胚乳愈伤组织分化的影响

在含有2,4-D的培养基上,胚乳愈伤组织不分化。胚乳愈伤组织在转入分化培养后出现了明显地增大,但在5d后,增殖作用下降并趋于稳定。在10d左右,组织块开始转绿,愈伤组织质地从较疏松转为致密。30d左右在不同的分化培养基上出现了不同的器官分化,只是在不同培养基中愈伤组织的分化频率和平均每个外植体的芽(根)数不同,在30d~45d是愈伤组织分化的高峰。在60d时,分化的不定芽逐渐形成完整的小植株,植株的叶片较小,颜色深绿,节间较短。

在猕猴桃胚乳愈伤组织分化过程中(表2.2),在不含BA或较低BA浓度(1μmol/L)的培养基上,没有出现不定芽的分化。随着BA浓度的增加,有明显促进不定芽分化的作用。同时,高浓度的NAA(0.5μmol/L)对不定芽的分化有较明显的抑制作用。

由猕猴桃愈伤组织形成不定根的过程相对容易。在低NAA和BA浓度下,其不定根的发生较多;在过高浓度的BA和NAA添加区,不定根形成明显受到抑制。

表2.2植物生长调节剂对“金桃”胚乳愈伤组织分化的影响

Table2.2EffectsofPlantGrowthregulatorsonorganformationfromthecallusderivedfromendospermof‘Jintao’

植物生长调节剂

Plant growth regulators

外植体数Number of explants

不定芽分化率

Rate of shoot formation

(%)

平均不定芽数

Number of shoot per explant

不定根分化率

Rate of root formation

(%)

平均不定根数

Number of root per explant

NAA

BA

(μmol/L

(μmol/L

0

0

24

0.00

0.00

0.00

0.00

0.1

1

24

0.00

0.00

50.00 a

2.17±1.19 a

0.1

5

24

29.17 a

2.71±0.76 a

33.33 a

2.75±0.71 a

0.1

10

24

25.00 a

2.67±1.03 a

16.67 a

3.00±0.82 a

0.5

1

24

0.00

0.00

29.17 a

2.14±1.07 a

0.5

5

24

8.33 b

1 ±0.00 b

33.33 a

1.63±0.74 a

0.5

10

24

0.00

0.00

8.33 b

2.50±0.71 a

注:数据为接种45d后统计;平均值±标准差;表示处理间在5%水平上显著性差异(邓肯式多重分析)。

Note:Dataweretakenafter45daftercultured;Mean±SE(standarderror);Valuesfollowedbysameletterswithinacolumnarenotsignificantlydifferentatthe5%level(Duncan’smultiplerangetest).

2.3培养基种类对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响

MS、1/2MS和B5三种不同基本培养基对猕猴桃胚乳愈伤组织的分化有显著影响。将30d左右的猕猴桃胚乳愈伤组织转入含0.1μmol/LNAA+5μmol/LBA+20g/L蔗糖的3种基本培养基中培养45d后,金桃胚乳愈伤组织在MS和1/2MS培养基中都有较高的器官分化率,而在B5培养基中分化率低;就不定芽和不定根的发生频率而言,其在1/2MS中最高。这可能与NH/NO比例和盐浓度有关。据报道,降低NH/NO的比率有利于提高木本植物不定芽的再生频率。基本培养基不仅影响不定芽形成率而且影响器官形成的数量(表2.3)。最高的平均再生芽数(2.75个/外植体)也是出现在1/2MS培养基上。因此,对不定芽形成而言,1/2MS效果最好,B5最差。1/2MS较低的盐浓度和1:1的NH/NO有利于不定芽和不定根的形成。

表2.3不同培养基对“金桃”胚乳愈伤组织分化的影响

Table2.3Effectsofmediaonorganformationfromthecallusderivedfromendospermof‘Jintao’

培养基

Media

外植体数

Number of explants

不定芽分化率

Rate of shoot formation(%)

平均不定芽数

Number of shoot per explant

不定根分化率

Rate of root formation(%)

平均不定根数

Number of root per explant

MS

18

33.33

1.67±0.82 a

38.89

2.00±0.82 a

1/2MS

18

33.33

2.83±0.75 a

33.33

2.83±1.33 a

B5

11

9.09

2.00±0.00 a

9.09

2.00±0.00a

注:数据为接种45d后统计;平均值±标准差;表示处理间在5%水平上显著性差异(邓肯式多重分析)。

Note:Dataweretakenafter45daftercultured;Mean±SE(standarderror);Valuesfollowedbysameletterswithinacolumnarenotsignificantlydifferentatthe5%level(Duncan’smultiplerangetest).

2.4蔗糖浓度对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响

蔗糖浓度对猕猴桃胚乳愈伤组织的器官分化有显著的影响(表2.4)。

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