论文摘要：研究越橘离体繁殖影响因素，筛选越橘离体所需最佳启动、增殖和生根培养基及培养条件。为发展越橘产业化生产及建立越橘工厂化育苗，越橘商品基地的建立提供充足优良的苗木及提供技术支撑。
论文关键词：越橘,组织培养,快速繁殖
越橘，又称蓝莓，属于杜鹃花科乌饭树属(Vaccinum)，为多年生落叶或常绿果树，呈灌木状生长。果实为浆果，蓝色，近圆形;单果重0.5~2.5g，最大可达3.5~5.0g果肉细腻，种子极小，甜酸适中，具有宜人的香气，可鲜食，也可加土成果汁饮料、果酒等饮品。
越橘果实深蓝色，富含花色苷，低糖、低脂肪，抗氧化能力名列所有果品、蔬菜之首，对防止人体细胞衰老，预防老年性疾病，如心脏病、白内障、癌症、记忆力衰退等，具有特殊的功效，是国际粮农组织公布的五大健康食品之一，在美国、日本等发达国家都已引起重视，成为一种很有发展前途的小果类果树。
越橘是一种新兴的保健水果，在医药、化妆、食用色素和食品加工等方面有广泛用途。越橘果实深蓝色，抗氧化能力名列果蔬之首。果实所含的花青素是迄今已被利用的最佳天然色素，加工稳定性高，色泽呈深红、紫红或蓝紫，作为药物或高级化妆品的原料均具有十分广阔的前景。近几年，其鲜果和加工品风靡欧美等发达国家，虽然价格昂贵但仍供不应求。北美地区的产量已远不能满足本地和国际市场的需求，为此荷兰、加拿大、澳大利亚、日本、智利等国家先后引种栽培，现已初具商品产量。
1组织培养技术研究
1.1无菌繁殖系的建立
越橘的离体培养已成为快速繁育无病毒苗木的主要途径。随着品种的更新换代及生产上对优良品种的无病毒苗木的大量需求，越橘茎尖和叶片培养将更为迅速的发展，并发挥越来越大的作用。在茎尖和叶片培养中，无菌繁殖系建立是整个培养过程的基础，遇到的困难也较多，其中降低外植体接种的污染率、提高分化率是最为首要的间题。
为减少各个过程中组织培养褐变的发生，加入活性炭和抗坏血酸都能达到明显的效果，而且抗坏血酸的效果要比活性炭更好，在其浓度为100mg/L时，褐化率仅为13%，而且褐化率与实践长短成正相关。
目前诱导越橘芽再生的激素主要是ZIP、ZT、ZTR和TDZ，ZIP使用中通常浓度较高，虽然ZT和ZTR的不定芽诱导率通常是ZIP的数倍，但ZT、ZIP价格昂贵。TDZ对越橘的一些品种不能实现再生，并且ZIP、ZT和ZTR也不能在所有越橘品种中实现再生。
Samir(2005)以茎段为外植体，在对越橘的3个栽培种(‘Regal’、‘Splendor’、‘Emtedank’)和2个无性系变种(‘NL1’和‘NL2’)腋芽增殖研究中发现，碳源的种类、浓度及它们之间的相互作用对枝条再生具有影响。在葡萄糖、山梨醇和蔗糖3种碳源中，虽然葡萄糖对促进再生枝条的生长与蔗糖具有同样的作用，而且在葡萄糖浓度为10g/L，时，对‘NL1’种的培养效果好于蔗糖，但蔗糖为20g/L时培养效果最好，包括外植体的培养反应和芽再生潜力；碳源的浓度对于腋芽的萌发几乎没有影响。再生培养基中蔗糖的浓度变化对立体叶片的再生频率和平均不定芽数有着明显的影响。再生培养基中蔗糖浓度为20g/L时最适宜越橘茎尖的不定芽的发生，再生频率和平均不定芽数最高。
1.1.1取材时间
外植体的种类是影响组织培养的重要因素之一。不同组织和器官，因为其不同的生长发育阶段和特性，在组织培养中产生的效果是不同的。许多植物以茎段作为外植体诱导愈伤组织的成功率要远远高于用其他外植体诱导（李淡等，2003）。对于越橘而言，外植体采集最好选择水培后萌发的芽或在春季采集，此时不仅植株生长旺盛，并且能够有效降低污染率，幼龄植株的分化能力也较强。同时应尽可能选择在一年生或当年生枝条上采集外植体。
不同时期获取的植物茎段，会产生不同的分化效果。Sidorocich.E.A.等，认为4月时茎段获取的最适宜时段。茎段分化芽多，且不产生愈伤组织。其他时期的茎段培养，愈伤组织较多，芽分化水平低，生长慢，且有褐变发生。
王连润等人以夏普蓝、戴安娜等六个蓝莓品种为外植体于立1O月中旬从田间健康生长的植株上选取带壮芽的休眠枝条，去除叶片后用洗洁精溶液洗净，流水冲洗20rain。在超净台上将枝条剪成3-4cm茎段，每个茎段带1-2个隐芽。结果显示，以带隐芽的健壮材料建立无菌苗，其污染率低，最高不超过8％，成苗率高，90％以上的芽能抽梢形成正常的绿苗。
1.1.2外植体的选择与灭菌
在越橘上已能从叶片、胚（HrlskoD.1993）等外植体上诱导出不定芽，根的外植体诱导尚未成功。大部分报道都是进行越橘诱导叶片直接再生不定芽。据报道，高丛越橘，兔眼越橘研究表明，可以通过叶片诱导分化不定芽。矮丛越橘的组织培养产生不定芽和愈伤组织则通过子叶或胚偶尔获得。利用非子叶叶片器官诱导不定芽再生也有一些报道。Chernik等（1992）对上胚轴直接诱导不定芽进行了研究，Sidorovich等对种子和胚诱导生成不定芽也做了研究都未成功。由于植体先诱导愈伤组织，再诱导不定芽也是越橘组织培养的一个途径。目前已能从多种外植体诱导出愈伤组织进而分化出不定芽。 1/5 1 2 3 4 5 下一页 尾页 |
