论文导读::红豆树(OrmosiahosieietWils)别名鄂西红豆、花梨木、花榈木。取红豆树半木质化嫩枝带牙茎段。开展优良单株的选择和组织培养等无性繁育技术育苗。
论文关键词:红豆树,带牙茎段,组织培养
红豆树(Ormosia hosiei et Wils )别名鄂西红豆、花梨木、花榈木,蝶形花科红豆树属常绿或半落叶乔木,为我国特有树种,国家Ⅱ级保护珍稀濒危植物[1],自然分布于福建、浙江、江西、江苏、湖北、湖南、陕西、四川、贵州等省,多生于海拔400-650m的丘陵、河边或山谷常绿阔叶林中[2]。红豆树以其鲜红艳丽的种子、优质的木材著称于世,具有极高的材用、景观和森林文化价值。木材光滑坚硬,纹理美丽,不经油漆却形同墨玉,因而与红木齐名,是我国最珍贵乡土用材之一,目前市场价达2万元/m3以上;其树冠浓荫覆地,树姿优雅清秀,枝叶翠绿发亮,是优良的庭院绿化树种。但现存红豆树天然资源稀少,结实年龄很迟且不稳定,一般在35a左右才开花结实,结果盛期在50 a以后带牙茎段,而且通常需间隔3-5年开花结果一次,极少连年开花结果,种子传播扩散和自然繁衍能力差,种子来源少,种苗紧缺,制约了红豆树的规模发展[3-5]。20世纪70-80年代,福建省建瓯水西、邵武卫闽、三明辛口等多个国有林场先后开展了小规模营造红豆树人工片林,但因使用种子苗造林,其林木个体间在树高、胸径、枝下高、通直度及心材率等分化与变异程度大,严重影响红豆树人工林高效栽培,开展优良单株的选择和组织培养等无性繁育技术育苗,规模化生产优质苗木,对高效保育珍稀濒危红豆树资源具有重要的理论意义与实际
应用价值。蝶形花科树种已见檀属的海南降香黄檀的离体培养和植株再生(朱靖杰,
2005),有关红豆树的组织培养技术尚未见报道,仅见姚军等(2007)对同科、同属的
花榈木,采用种子无菌萌发获得的带叶茎段,进行组织培养和快速繁殖研究的报道。
因此,我们对其进行了组织培养技术研究,以期探索出一条通过组织培养的方法大量繁殖红豆树苗木,满足市场需求免费论文网。
1 材料与方法
1.1 外植体来源
供试材料为3a生红豆树优树根蘖苗经移栽促萌长出的萌条,取其带芽茎段先经清水冲洗(嫩枝0.5h,老枝1h)后,在超净工作台上用75%的酒精浸泡30s后,再用0.1%升汞浓液浸泡8-10min,最后用无菌水冲洗4-5次。
1.2 外植体取材方式
外植体取材采用三种不同方式,分别取茎的顶端、中段和下段,要求带芽的茎段。
1.3 外植体处理方法
将外植体萌芽条切成1-2cm的小段,保留1-2个小芽,竖直插入诱导培养基中。萌芽后转接增殖培养基。
1.4 培养条件及培养基
本试验培养温度为26±2℃,光照时间为12h/d,光强为2000-3000LX,湿度为60-70%。诱导和芽增值培养均以MS全价培养基为基础,外植体诱导培养基采用 MS+BA0.5mg/L+ NAA0.05 mg/L;增殖培养采用附加不同浓度的BA、NAA,以找出增殖效果最佳的配方,使用的增殖培养基种类如下: (1)MS+BA0.5mg/L+ NAA0.1mg/L; (2)MS+BA1.5mg/L+ NAA0.1 mg/L;(3)MS+BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L;(4)MS+BA4.0mg/L+ NAA0.1mg/L;(5)MS+BA0.5mg/L+ NAA0.2 mg/L;(6)MS+BA1.5mg/L+NAA0.2 mg/L;(7)MS+BA2.0mg/L+ NAA0.2 mg/L;(8)MS+BA4.0mg/L+ NAA0.2 mg/L;上述各培养基加入3%蔗糖和0.6%琼脂带牙茎段,调pH为5.8。
1.5 培养过程
外植体接种后,统计接种瓶数,培养7天后及时观察、记载,淘汰污染的培养瓶数,待萌芽长致2-3cm时,及时转接到增殖培养基上,观察增殖倍数。
2. 结果与分析
2.1 不同外植体取材方式萌芽情况比较
外植体取半木质化嫩枝的带芽茎段(茎顶端、中段和下段)及木质化老枝的带芽茎段(茎顶端、中段和下段)等不同方式,切成1-2cm的小段,经消毒后接入诱导培养基中,其萌发情况见表1。
表1 红豆树不同外植体接种方式的萌芽情况比较
外植体
|
取材部位
|
接入种数/个
|
污染率/%
|
萌发率/%
|
生长情况
|
幼枝
|
茎顶端
|
35
|
31.34
|
58.33
|
极佳
|
茎中段
|
34
|
35.29
|
50.00
|
较好
|
茎下段
|
36
|
36.11
|
47.82
|
较好
|
老枝
|
茎顶端
|
53
|
64.15
|
15.79
|
一般
|
茎中段
|
78
|
78.21
|
11.76
|
较差
|
茎下段
|
106
|
89.62
|
9.09
|
极差
|
注:表中的萌发率是淘汰已污染的培养瓶数后,已萌发接种瓶数与未污染瓶数之比。
由表1可知:取材红豆树嫩枝的茎顶端,其污染率最低,为31.43%,萌发率最高为58.33%,萌发时间最短,生长最好;取材老枝的茎下段污染率最高,为89.62%,萌发率最低为9.09%,萌芽最迟,生长极差。
2.2.BA和NAA不同浓度组合对红豆树茎芽萌发及增殖的影响
取红豆树半木质化嫩枝带牙茎段,用8种不同的增殖培养基进行萌芽和增殖试验。
表2结果显示:BA与NAA配合使用时,以序号(3)的培养基,浓度为BA2.0mg/L+ NAA0.1 mg/L,萌芽最快,萌芽率最高为53.1%,新生芽数最多,长势好,增殖倍数最大,达到5倍以上(见图1)。而序号(1)的培养基激素配比和浓度为BA0.5mg/L+ NAA0.1 mg/L,萌芽慢,萌芽率为19.35%,新芽少,长势差,无增殖(见图2)。序号(2)的培养基激素配比和浓度为BA1.5mg/L+ NAA0.1 mg/L,萌芽的长势仅次(3)培养基,增殖倍数为3倍(见图3 )。浓度较高的NAA对芽的后期生长不利,如:序号(5)~(7)的培养基, NAA浓度均为0.2 mg/L,而BA浓度分别为0.5mg/L、1.5mg/L和2.0mg/L,都表现为芽生长不整齐(见图4,a,b,c)免费论文网。从表中还可见高浓度的BA也会抑制芽的生长,如序号(4)和(8)培养基, BA浓度都为4.0mg/L,而NAA浓度分别为0.1mg/L和0.2mg/L,芽都不生长(见图5)。
表2 BA和NAA不同浓度组合对红豆树茎芽萌发及增殖的影响
增殖培养基序号
|
BA浓度/mg/L
|
NAA浓度/mg/L
|
接种茎芽数/个
|
萌发率/%
|
最早萌发天数/d
|
萌发高峰期/d
|
平均增殖倍数
|
芽生长状况
|
1.
|
0.5
|
0.1
|
31
|
19.35
|
13
|
-
|
0
|
萌发迟,牙不生长
|
2.
|
1.5
|
0.1
|
35
|
31.43
|
9
|
30
|
3
|
萌发较快,牙不整齐
|
3.
|
2.0
|
0.1
|
39
|
51.28
|
7
|
28
|
5
|
萌发快,牙整齐
|
4.
|
4.0
|
0.1
|
33
|
6.06
|
18
|
-
|
0
|
萌发迟,芽不生长
|
5.
|
0.5
|
0.2
|
30
|
23.33
|
15
|
32
|
2
|
萌芽慢,生长慢
|
6.
|
1.5
|
0.2
|
42
|
30.95
|
14
|
33
|
2
|
萌芽较快,生长慢
|
7.
|
2.0
|
0.2
|
36
|
41.67
|
11
|
30
|
2
|
萌芽快,生长慢
|
8.
|
4.0
|
0.2
|
31
|
9.68
|
19
|
-
|
0
|
萌发迟, 芽不生长
|
2.3 芽的分化与增殖
切取诱导培养生长至高约2cm的小芽带牙茎段,接种到培养基(1)中继续培养,13d后,芽基部膨大,单芽基部愈伤组织分化不明显,芽萌发迟,芽不生长。在培养基(2)、(5)~(7)中,单芽基部愈伤组织分化明显,21d后从愈伤组织中分化出许多绿色芽点,但只有部分不断抽出伸长,芽生长不整齐。而培养基(3)中,2ld后不定芽基部产生愈伤组织的同时,腋芽大量分化、伸长,28d后达到最大,芽萌发快,且整齐。在培养基(4)和(8)中,则表现为萌芽受到抑制,芽不生长。
3 小结与建议
3.1 红豆树外植体取嫩枝的萌芽率平均为52.05%,老枝萌芽率平均为12.2%。因此,组培外植体的取材部位,以取半木质化嫩枝顶端带牙茎段为好。
3.2 增殖培养试验可知,增殖培养基以序号(3),浓度为BA2.0mg/L+ NAA0.1mg/L,增殖效果最为理想。
3.3 红豆树的生根培养基、移苗种植及后期苗圃的管理还有待进一步的研究和完善。
参考文献
[1]国务院批准公布.国家重点保护野生植物名录(第一批)[J].植物杂志,1999(5):4—11
[2]陈存及,陈伙法.阔叶树种栽培[M].北京:中国林业出版社,2000:232—236.
[3]章浩白,吴厚扬,林文芳,等.福建森林[M].北京:中国林业出版社,1993.
[4]何汇珍.福建植物志第三卷[M].福州:福建科学技术出版社,1987.
[5]郑天汉,汤文彪,陈清根,等.红豆树开花结实规律及种子发芽研究[J].林业科技开发,2006,20(6):38-41.
[6]姚军,李洪林,杨波.花榈木的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯,2007,43(1):123-124
[7]朱靖杰.海南降香黄檀的离体培养和植株再生.植物生理学通讯,2005,41(6):793
[8]冯建国,季新良,周志春,等.2007.特种经济高档用材红豆树培育技术.林业科技开发,2l(5):41-43.
(图1)img width=220 height=166 src='/d/file/picture/201204/23/48.files/image002.jpg'>(图2)br>
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