| 植株带毒状况检测(ELISA)表明，分生组织培养对黄瓜花叶病毒的脱毒率为76%，但完全不能脱除香蕉条纹病毒。而超低温处理对黄瓜花叶病毒和香蕉条纹病毒的脱毒率分别为30%和90%。
1.3葡萄A病毒(GrapevinevirusA,GVA)
葡萄A病毒(GVA)归属于Vitivirus，是葡萄克勃茎沟病(Koberstemgrooving,KSG)的病原。葡萄克勃茎沟病(KSG)是葡萄粗皮综合症(Rugosewoodcomplex)的四种症状类型之一。葡萄A病毒存在于植株韧皮部，由粉蚧传播。感染葡萄粗皮综合症的植株表现出生长势减弱，植株矮小，春季萌芽延迟，严重时会导致植株衰退死亡；部分植株嫁接口上部肿大，形成“小脚”现象；有的嫁接口上部树皮增厚，木栓化，组织疏松粗糙；嫁接口附近的木质部和树皮形成层常可见凹陷的茎痘斑或茎沟槽。染病植株萌芽延迟，生长受到抑制，产量降低，嫁接成活率低。
Wang等以田间感染GVA的“Bruti”葡萄品种(VitisviniferaL.)试管苗为试材，取1mm的茎尖进行超低温冷冻。再生植株经WesternBlotting检测其带毒状况。结果表明，茎尖超低温处理的脱毒率为97%,而茎尖培养(0.2mm)为12%。进一步的研究表明，液氮处理前的各步骤均不能脱毒，唯有液氮处理才能脱毒。这一结果证明，超低温脱毒是通过液氮处理而实现的。对超低温处理获得的再生植株的形态观察结果表明，其植株的叶片形态与对照是一致的。基于上述结果，作者认为茎尖超低温脱毒是一种简便而有效的脱毒技术，为植物脱毒开辟了一条崭新的途径。
1.4草莓轻型黄边病毒（Strawberrymildyellowedgevirus,SMYEV）
草莓轻型黄边病毒(SMYEV)是危害我国草莓生产的4种主要病毒之一，主要危害草莓属植物。SMYEV属黄症病毒属，通过蚜虫传播。单独侵染时，仅使植株轻矮化，但该病毒很少单独发生，常与其他病毒复合侵染，引起叶片黄化或叶缘失绿，植株生长势严重减弱，植株矮化，产量和果实质量严重下降，减产可高达75％。
蔡斌华等以草莓品种“明宝”为材料，取茎尖做初代培养。继代扩繁5次后，取2mm左右的茎尖，利用玻璃化超低温处理茎尖，获得再生植株。用RT-PCR技术对再生植株进行病毒检测。结果表明，经玻璃化超低温处理后，对SMYEV的脱除率为95％，而对照完全不能脱毒。
1.5树莓丛生矮化病毒(Raspberrybushydwarfvirus,RBDV)
树莓丛生矮化病毒(RBDV)是Idaeovirus属的唯一一种,该病毒通过花粉传播，可危害树莓(Rubusidaeus)、罗甘莓(R.loganobaccus)、博伊森莓(R.ursinus)和黑树莓(R.occidentalis)等。在全球悬钩子属果树主产区均有分布。给悬钩子属果树生产造成巨大危害。已有的研究结果表明，树莓丛生矮化病毒难以通过传统的脱毒技术(如茎尖培养、热处理、热处理结合茎尖培养等)脱除。
Wang等以感染RBDV的树莓试管苗为试材，分别进行了茎尖培养(0.1-0.3mm)、热处理结合茎尖培养(1mm)及茎尖(1mm)超低温疗法。结果表明，上述三种方法均不能脱毒。随后，Wang等把热处理和茎尖超低温相结合以期脱除RBDV。他们先将带毒的试管苗置于热处理条件下(白昼38℃，黑夜26℃，16小时的光周期)处理4-5周后，取茎尖(1mm)进行超低温处理。结果发现，热处理4-5周的茎尖经超低温处理后，其脱毒率可达33-35%。由此，他们认为，热处理结合茎尖超低温处理可能是目前植物脱毒最有效的一种方法，该法甚至能有效地脱除能侵染茎尖分生组织的病毒，如RBDV。
1.6柑桔黄龙病(CitrusHuanglongbing,HLB)
柑桔黄龙病(CitrusHuanglongbing,HLB)又称黄梢病、黄枯病、青果病，是由一种被称为韧皮部杆菌的细菌引起的病害。该细菌寄生在柑桔韧皮部筛管细胞内，为革兰氏阴性细菌(CandidatusLiberobacterasiaticum)。该病原通过柑桔木虱传播。HLB能侵染柑桔属(Citrus)、金柑属(Fortunella)和枳属(Poncirus)植物。主要分布在亚洲和非洲的40多个国家。在我国，主要分布在广东、广西、福建和台湾四省。感病后的柑桔树可在3-5年内丧失结果能力，甚至导致植株死亡。给柑桔生产造成巨大经济损失。
Ding等对茎尖超低温脱除HLB进行了系统研究。他们发现，利用茎尖超低温处理能有效地脱除HLB。对5个材料的HLB脱除率分别为：罗岗橙，93%、碰柑，93%、沙田柚，94%、北京柠檬，91%和红江橙，91%。
2茎尖超低温脱毒的机理
病毒在植物体内的分布是不均匀的：带毒植株的病毒浓度随距顶端分生组织靠近而降低；反之，则升高。 2/3 首页 上一页 1 2 3 下一页 尾页 |
