| 第7组：四季桔；第8组：越南金柑1~5号（材料15、16、17、18、19）。第1组中，融安滑皮金柑与阳朔金弹1遗传相似系数最大，达0.98，与融安金弹的遗传相似系数为0.97，证明为金弹的变异系，诱变金柑1号与融安金弹的遗传相似系数最大，为0.95，从引物U834的扩增结果看，诱变金柑1号与金弹比较，多一条特异带（图1箭头处），说明已发生一定的变异，其遗传特性有待进一步研究；第二组中，越南金柑6号与金枣、宁波罗纹聚在一起，但与金枣实生苗的遗传相似系数较大，为0.90，其叶片及果实形态与金枣的相似度也很高，应为同一起源，金枣与宁波罗纹的亲缘关系比其它种之间近；越南引进的金柑资源1~5号均聚在金柑和四季桔之外，与四季桔亲缘关系较近，可能也是金柑与其它柑桔的杂交后代；中国农业科学院柑桔研究所提供的4份金豆资源中，福建金豆与其它3种金豆资源分开，亲缘关系较远，遗传相似系数小于0.78；四季桔聚在金柑属其它种与越南金柑1~5号资源之间；来自中越边境的山桔（金柑）聚在金柑属的所有种与四季桔之间，它与金弹的遗传相似系数比四季桔与金弹的遗传相似系数大。
图225份供试金柑资源的ISSR聚类图
Fig2.Dendrogramofthe25FortunellaaccessionsbyISSRmakersbakesonUPGMAanalysis
3讨论
根据本研究结果，在遗传系数为0.85处将25份资源划分为8类，即金弹及其变异系，金枣、越南金柑6号和宁波罗纹，长寿金柑，福建金豆；金豆（2002-29，2002-30，2002-36），山桔（金柑），四季桔，越南金柑（1~5）号。金柑野生种质、引进资源及栽培种的变异系的亲缘关系基本明确，原有金柑属种间的聚类结果与前人的分类基本一致。
融安滑皮金柑与阳朔金弹1遗传相似系数最大，达0.98，与融安金弹的遗传相似系数为0.97，证明其为金弹的变异系。
越南引进的金柑资源中，越南金柑6号与金枣、宁波罗纹聚在一起，与金枣实生苗的遗传相似系数为0.9，其叶片及果实形态与金枣的相似度也很高，应为同一起源，其余的1~5号均聚在金柑和四季桔之外，与四季桔亲缘关系较近，可能也是金柑与其它柑桔的杂交后代。
诱变金柑1号和2号是金弹经秋水仙素诱变多倍体的后代，诱变金柑1号与融安金弹的遗传相似系数最大，为0.95，从引物U834的扩增结果看，诱变金柑1号与金弹比较，多一条特异带（图1箭头处），目前2个单株均已经开花结果，形态和细胞学上有明显的特异性，说明已发生一定的变异，其遗传特性有待进一步研究。
中国农业科学院柑桔研究所提供的4份金豆资源中，福建金豆与其它3种金豆资源分开，亲缘关系较远，遗传相似系数小于0.78。
四季桔聚在金柑属其它种与越南金柑1~5号资源之间，表明它与金柑和柑橘属均有亲缘关系，支持了前人的分类结果。
本研究发现，来自中越边境的山桔（金柑）聚在金柑属的所有种与四季桔之间，它与金弹的遗传相似系数比四季桔与金弹的遗传相似系数大，达0.78。形态上与原有的金柑属中所描述的山金柑和长叶金柑有些相似，但与山金柑比较，它不是四倍体，与长叶金柑比较，其叶片形态和果实色泽不一致，山金柑和长叶金柑均没有单胚性状的描述，因此认为山桔（金柑）可能是金柑属的新变种或种类。因其具有单胚性及早熟等特性，是金柑优良的育种资源。
4.结论
10条引物共扩增出120条带，其中102条具有多态性，多态性带比率为85%。用UPGMA软件进行聚类分析，25份来自中果越南的金柑属及金弹变异系种质资源的遗传相似系数在0.48~0.99之间，在遗传系数为0.85处可将25资源划分为以下8组，第1组包括：融安金弹、阳朔金弹及金弹变异系；第2组包括：金枣、越南金柑6号及宁波罗纹；第3组：长寿金柑；第4组：福建金豆；第5组包括：金豆2002-29、金豆2002-30和金豆2002-36；第6组：山桔（金柑）；第7组：四季桔；第8组：越南金柑1~5号。亲缘关系分析结果表明：融安滑皮金柑为金弹的变异系；中越边境的“山桔（金柑）”可能为金柑属的新变种或种类；越南引进的金柑资源中，越南金柑6号与金枣应为同一起源，其余的越南金柑资源疑为金柑与宽皮柑桔的杂交后代；诱变金柑1号与金弹的遗传相似系数为0.95，形态上有明显的变异，其遗传特性有待进一步研究。
致谢：谨向在本研究的资源调查、收集及试验过程中给予协助的单位和同行表示衷心的感谢！由于篇幅有限，具体名单不一一列出。
参考文献
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