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有机磷农药快速检测方法研究进展

时间:2011-04-22  作者:秩名

论文导读:酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分残留农药进行快速检测的技术。利用有机磷农药可特异性的制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性,破坏神经的正常传导,使昆虫中毒致死的原理进行检测。
关键词:有机磷农药,快速检测
 

有机磷农药能有效地控制害虫、杂草及细菌的生长,提高农业产量。但农药中有些物质在一定环境条件下能长时间保持其毒活性,若长时间摄取残留农药则会影响人类的健康。残留农药在人体内不断累积,能引起各种严重疾病[1]。因此,研制出有机磷农药快速、可靠、灵敏和实用的农药残留分析方法,使其不受时间、地点、场合等条件限制,有利于及时发现问题,采取措施,控制高残留农药蔬菜的摄入,降低农药中毒发生率,保障消费者的食品安全。

1.气相色谱法

1.1 气相色谱技术

气相色谱法(GC)是一类分离分析方法,它是根据分析物质在固定相和流动相之间的分配系数的不同达到分离目的,并将分析物质的浓度转换成易被测量的电信号,然后送到记录仪记录下来的方法。GC法的分析对象是气体和可挥发物质,其优点是分离效能高、选择性高、分析速度快。目前,GC法已由过去以填充柱为主转到以毛细管为主。但是,对于沸点高和热稳定性差的农药,GC法不能进行分离检测,需先进行衍生化法处理后再进行GC分析检测。

1.2 气相色谱现状

气相色谱法是检测有机磷的国家标准方法,检出限为1 ng,具有既能定性又能定量、准确、灵敏度高,且一次可测定多种成分等优点。其主要通过相对保留值来定型,通过峰高与峰面积并采用内标法和外标法来定量。曲丽萍、张晓波[2~3]等分别对大米样品和小麦样品中残留的有机磷农药,通过较为简便的提取方法和实用有效地净化处理,用毛细管柱气相色谱法进行测定,方法所需时间短、干扰小、准确可靠、易于操作、回收率和检出限均能满足大米、小麦样品中残留农药检测的需要。刘永波[4]等采用选择离子—气相色谱—质谱联用(SM-GC-MS)方式,依据保留时间和特征离子峰度比,对农药进行确证,此方法可在36min之内检测有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯等48种农药,并可同时定性和定量,对蔬菜、水果等多种农产品进行检测。尽管色谱法灵敏且准确,但需要对样品进行前处理,成本高,而且所需仪器昂贵而笨重,需要专业人员维护,不适合在线检测。

2.酶抑制法

酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分残留农药进行快速检测的技术。利用有机磷农药可特异性的制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性,破坏神经的正常传导,使昆虫中毒致死的原理进行检测。

2.1 电化学法

电化学方法对有机磷的检测一般有两种传感器。一种是胆碱酯酶电化学生物传感器。常用的又有单酶传感器和双酶传感器。单酶传感器是将乙酰胆碱酯酶(AChE)固定在电极表面,酶催化底物乙酰或丁酰巯基胆碱生成巯基胆碱,通过对有机磷在AChE抑制前后生成的巯基胆碱的检测来测定有机磷的含量。免费论文。而双酶传感器是用AChE与胆碱氧化酶(COx)共同修饰制备酶电极,通过对生成的双氧水的检测达到对有机磷检测的目的。宋昭[5]等以丝网印刷电极为载体,以明胶包埋为主要方法制备了基于乙酰胆碱酯酶和胆碱氧化酶的电流型生物传感器,并对其性能进行了一系列评价,发现该酶电极在pH值为6.8,温度为37℃时对氯化乙酰胆碱有最大响应,其稳定期可达30d,测量的平均相对偏差为2.18%。利用敌百虫对酶电极的抑制作用,可实现传感器对其的快速检测,测定时间可控制在10min,其测量的线性范围为10-10~10-15mol/L,对敌百虫的检出限为1×10-10mol/L。尽管胆碱酯酶生物传感器在环境检测方面灵敏实用,但在线分析应用上仍存在不足:如这类传感器只能测出各类农药的总量,其选择性低;酶电极重复使用率低,成本高,检测过程繁琐、费时;AChE本身是不太稳定的酶,制备的生物传感器稳定性也不太好等。

2.2 酶片显色法

在酶抑制作用下,减弱某种显色反应来完成有机磷的检测。免费论文。刘海霞等在检测有机磷农药的酶分析法中,通过两种不同显色剂(2,6-二氯靛酚乙酯和固B盐)的显色原理及性能对比实验,证实了采用2,6-二氯靛酚乙酯既兼顾了底物和显色剂双重作用,又具有底物稳定性好、灵敏、简便、实用的特点,同时也体现出2,6-二氯靛酚乙酯法的优越性。大量实验证明,用植物酯酶片代替从动物体和血液中提取的胆碱酯酶作为酶源,不仅来源广、价格低,而且获取方便。纪淑娟等发现有机磷农药可以抑制胆碱酯酶的活性,在无有机磷农药存在时,氯化乙酰胆碱在胆碱酯酶作用下可以生成醋酸;当有机磷农药存在时,胆碱酯酶的活性受到抑制,作为其分解产物的醋酸也相应减少。农产品施用有机磷农药后,样品对胆碱酯酶活性抑制程度的高低,可以反应有机磷农药残留量的多少,而且可以通过产酸量的多少进行估算。根据上述反应特性,依据指示剂颜色或反应液pH值的变化,就可以对有机磷农药残留的情况进行定性或半定量分析。免费论文。酶片显色法可快速地对农药进行在线检测,但它也存在酶容易失活的问题。

3.结语

有机磷农药的大量使用造成了严重的环境污染甚至危及到人类的健康,发展有机磷快速检测方法越来越受到人们的重视。随着人们对环保问题的日益关注,人们对食品安全意识的逐步提高,新的农药品种将不断进入市场,并且对农药检测限的要求将会更低,所以需要研究更加灵敏、可靠、快速的检测技术,以期在测定方法的多样化、测量灵敏度的提高、响应时间的缩短、仪器自动化程度和现场检测能力的提高等方面取得进步。


【参考文献】
[1] D.M.Ivnitskii,J.Rishpon.A potentio-metricbiosensor for pesticides basedon the thiocholine hexacyanoferrate(III)reaction[J]Biosens. Bioelectron,1994(9):569~576.
[2] 曲丽萍,国娜.气相色谱法快速测定大米中多种农药残留[J].黑龙江粮食,2005(6):21~22.
[3] 张晓波.气相色谱法快速测定小麦粉中多种农药残留[J].黑龙江农业科学,2005(4):14~16.
[4] 刘永波,贾立华,牛淑妍. 气-质联用快速检测蔬菜、水果中农药多残留的分析方法[J].青岛科技大学学报,2003,24(6):491~495.
[5] 宋昭,黄加栋,胡敏,等. 快速检测敌百虫浓度传感器酶电极的研究[J].传感器技术,2005,24(7):16~18.
 

 

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